Scooby-Doo là chú chó nhân vật chính, thuộc giống chó Great Dance. Hài hước, vui nhộn, tham ăn và sợ ma, mặc dù giống chó Great Dane của chú ngoài đời vô cùng to lớn, dũng mãnh và gan dạ.
Noville "Shaggy" Rogers. Chủ nhân của Scooby-Doo. Cậu ta là người khá vui nhộn, tham ăn. Dáng người cao và gầy nhất nhóm. Cậu mặc một chiếc áo màu xanh lá cây, quần màu nâu. Shaggy thường là người đầu tiên trong nhóm nhìn thấy ma (cậu rất sợ ma, thậm chí nhát hơn cả Scooby). Khả năng của cậu là chạy (gặp ma là chạy liền, có khi còn chạy nhanh hơn Scooby). Điểm vui nhộn của bộ phim nằm ở tính cách nhút nhát của Shaggy và Scooby, giúp tạo nên những tính huống trớ trêu cười ra nước mắt.
Velma Dinkley. Là cô gái đeo kính trong nhóm, mặc áo màu cam. Velma rất thông minh, với trí tuệ siêu phàm của mình Velma đã nhiều lần giúp cả nhóm đi tìm ra manh mối (để biết ai là ma) và phá án.
Daphne Blake. Là cô gái mặc váy tím, mái tóc dài màu cam trong nhóm. Daphne xinh đẹp, duyên dáng và là con nhà giàu. Trong phim Daphne là người hay bị mấy con ma bắt cóc nhất (và cô cũng bực mình về chuyện này).
Fred Jones. Là anh chàng tóc vàng điển trai, thủ lĩnh của nhóm. người lái chiếc xe tải con chở cả nhóm đi phá án. Cậu có mái tóc màu vàng, mặc áo trắng, quần xanh dương. Fred hay phải giải cứu Daphne khi cô bị mấy con ma bắt cóc.
